黄伟革，包辉英，吴国忠（上海医药高等专科学校，上海201318）

摘要：综合目前在青光眼实验研究中常用的高眼压动物模型构建方法，探讨传统中药对青光眼动物模型干预的机制与作用，结合中药在临床青光眼治疗中的进展和疗效，证实中药具有降眼压，保护青光眼患者视神经细胞，改善视功能等作用。

关键词：中药；干预；高眼压；动物模型；青光眼

青光眼是一群有很多不同病因所造成的眼病，特殊解剖学上表现为视神经的萎缩或视神经乳头凹陷的增大等异常。青光眼共同的生理病理特征是进行性的视神经萎缩和视野缺损，成为常见的致盲性眼病。目前研究认为^[1]，病理性的高眼压和视网膜中央动脉灌注压降低是两大主要高危因素，另外视网膜及细胞层内神经营养因子的减少，视网膜和玻璃体内谷氨酸浓度升高，血流变学异常，一氧化氮和自由基的增加，免疫性损害等因素直接或间接地造成视网膜节细胞调亡的发生。这表明，对于青光眼的治疗在控制眼压的同时，应重视非眼压性危险因素对视功能的损害，通过药物的干预，积极保护视神经，改善视功能。中药治疗青光眼有独到之处，大量的实验与临床研究显示，中药除降眼压外，在青光眼视神经保护、视功能改善等方面有很大的潜力和优势，现将传统中药对高眼压动物模型干预的机制与作用以及中药在临床青光眼治疗中的进展和疗效综述如下。

1 高眼压动物模型的应用近况

  青光眼作为一种不可逆性致盲眼病，其发病和视神经损害机制是复杂的，青光眼动物模型的建立对于这一疾病的发病机制，药物干预的疗效和视神经损害等方面研究具有重要的意义。目前尚无一种方法能够完全模拟人类青光眼的发病过程，但是高眼压作为发病的一个关键因素，在青光眼动物模型的建立中，无论体内或体外实验，高眼压模式成为动物模型建立的主要方法和标准。在实验动物中，猴最接近人类，是最理想的青光眼动物实验模型，但它价格昂贵，不易大量获得，国内这方面应用也鲜有报道^[2]。从种系发育、眼房角结构的发育进化相类似的角度来说，大鼠、家兔、猫是青光眼研究中最常用动物模型构建的对象，动物也较易获得。

1.1原发性青光眼动物模型

根据文献报道^[3]，已在兔、狗、猫、猴、鼠等动物中发现原发性青光眼，或称为自发性、遗传性青光眼，虽然这类动物模型是最理想的，但由于动物原发性青光眼的来源有限，不能

*基金资助：上海市教委科研创新项目基金资助，编号10YZZ41

满足对青光眼研究的广泛需要。

1.2急性高眼压动物模型

急性高眼压动物模型一般用于急性高眼压或青光眼早期眼压的控制和视网膜、视神经损害及其药效学的实验研究。目前常用的急性高眼压动物模型的诱导方法有：前房灌注法^[4]，生理盐水前房灌注并连接加压装置和压力表，方法简单，能控制眼压升高幅值和持续时间。巩膜上静脉结扎法^[5]，该模型通过缩小眼球体积的方法，阻滞房水通过巩膜上静脉外流而获得，眼压维持稳定，持续时间较长。

1.3慢性高眼压动物模型

由于慢性高眼压动物模型建立过程中形成的高眼压与慢性青光眼高眼压比较接近，因此被广泛地应用于青光眼发病机制与药物干预的实验和研究。现在最常用的方法有^[6]烧灼大鼠2～3条表浅巩膜静脉，或向角膜缘静脉注入高渗盐水构建动物模型。郝燕燕等^[7]采用倍频532nm激光阻断2条巩膜上静脉的方法，可构建理想的大鼠慢性高眼压模型。王影等^[8]在兔眼前房内分别注射复方卡波姆和糜蛋白酶构建模型，比较后认为，前房注射卡波姆是一种有效的慢性高眼压兔造模方法。戴乐等^[9]采用双极水下电凝器电凝大鼠巩膜表面三组静脉及角膜缘周围血管，减少房水静脉回流能成功复制慢性高眼压动物模型。李妍等^[10]研究发现，在兔角巩膜缘植入一次性输液管材料后，兔角膜缘发生强烈的排斥反应和炎症反应，使眼压升高，从而建立慢性长期性高眼压模型。以上方法都具有眼压升高稳定可靠、可控制、维持时间长、易操作、成本低等优点，为高眼压青光眼的防治提供了较理想的动物模型。

1.4体外细胞培养高眼压模型

细胞培养技术是现代实验研究的重要手段，体外细胞培养高眼压模型的建立，为青光眼高眼压的实验研究提供了另一种简便、有效的方法。它主要的优点是：能对视神经节细胞在压力作用下的生长情况进行全程观察，从而获得更多在动物模型中无法得到的实验数据。张虹等^[11]开放式压力控制培养系统设计组装成功，有望为青光眼体外研究提供理想实验模型。戴惟葭等^[12]采用无血清培养液选择分离法，获得人眼视神经乳头星形胶质细胞，方法经济简单，细胞纯度高，易储存并可用于青光眼高眼压的研究。

2 传统中药对青光眼动物模型的干预

2.1单味中药对青光眼动物模型治疗的影响

王慧力等^[13]用1.0%葛根滴眼液对家兔眼高压模型有降低眼内压作用，作用强度和药物的浓度之间有相关性。对快速注射葡萄糖而引起的眼压升高有抑制作用。葛根素具有β受体阻滞作用，能改善慢性高眼压兔眼视神经轴浆流和视盘微循环。药效的产生对房水药物浓度有滞后现象，且药效维持时间较长，表明葛根素是一种较理想的降低眼内压的药物，且提示有改善视力和视野的疗效。

盛艳梅等^[14]利用体外加压培养乳鼠视网膜神经节细胞建立高眼压模型，观察中药灯盏花素对体外高压诱导的视网膜神经节细胞（RGC）凋亡的影响，结果表明，与模型对照组比较，灯盏花素及阳性药（尼莫地平）均能明显对抗体外高压诱导的视网膜神经节细胞凋亡(P<0.05)。

韩华云等^[15]研究三七总皂苷对大鼠慢性高眼压视网膜损伤的影响，发现生理盐水对照组与三七总皂苷治疗组之间眼大鼠视网膜神经节细胞层(RGCL)计数有显著性差异(P<0.05)，三七总皂苷治疗组与正常对照组实验眼大鼠RGCL计数均有显著性差异(P<0.05)，说明三七总皂苷对持续性高眼压大鼠RGCL神经元损伤有部分保护作用。

钱爱华^[16]在兔高眼压动物模型实验中显示,银杏叶注射液能通过提高超氧化物歧化酶活性和降低丙二醛水平，清除高眼压状态下视网膜组织中产生的自由基的损害，减轻和修复高眼压状态下视网膜组织的损伤，对高眼压导致的视网膜损害有保护和治疗的作用。

杨新光等^[17]用新西兰白兔制作高眼压动物模型，一定剂量的藏红花提取液从耳缘静脉推注，每日1次，并设立高压对照组。结果显示治疗组视网膜神经节细胞的数量明显多于高压对照组(P<0.05)，说明藏红花提取液通过改善视网膜血液循环，阻断慢性高眼压条件下缺血缺氧对RGC的损害，对RGC起保护作用，提示藏红花提取液可能通过降低视网膜内的自由基，阻断自由基对RGC膜性结构、亚细胞器及细胞核的损伤，对RGC起保护作用。

李琳玲等^[18] 利用中药连翘提取物金丝桃素对兔急性高眼压的影响，证实金丝桃素可减轻急性高眼压对视网膜的损伤，这种作用可能是通过阻止视网膜谷氨酸水平的升高，减少谷氨酸的兴奋性毒性，来实现对视网膜的保护作用。

段俊国等^[19]研究灯盏细辛提取物（DSX）对高眼压大鼠视网膜一氧化氮(NO)含量以及视网膜神经节细胞(RGC)凋亡率的影响，结果发现,DSX减少高眼压大鼠视网膜中NO含量，或阻止其过量生成，从而维持或改善RGC生存微环境，减少NO对其产生的毒性作用，增强RGC对原发和继发损害的抵抗力，使已受损但仍存活的RGC部分恢复，或防止周围正常未损细胞的继发损伤而阻止神经继续变性，最终恢复或部分恢复已遭破坏的内在保护机制。

廖明怡等^[20]在中药刺蒺藜对兔高眼压模型的研究中发现，刺蒺藜在一定程度上能减轻高眼压状态下视网膜神经节细胞的凋亡。机制可能与改善视盘供血情况、清除自由基、提高机体抗氧化能力等多因素有关。

2.2中药复方对青光眼动物模型治疗的影响

中药复方是传统中医临床用药的主要形式和手段，其目的是使多味中药发挥增强疗效、减低副作用等相辅相成、相得益彰的作用，是中医治病用药的精髓所在。越来越多的学者利用中药复方对青光眼的治疗进行基础性研究并取得了显著的成果。

李德姣等^[21]在当归补血汤（当归、黄芪、麦冬、熟地黄等）对高眼压兔视网膜神经节细胞凋亡的抑制作用的实验中，通过计数凋亡视网膜神经节细胞数和其超微结构变化评估当归补血汤对细胞凋亡的抑制作用。结果发现，正常组和给药组(眼压降至正常的兔高眼压模型)之间差异无显著性，但明显低于高压对照组(P<0.01)；视网膜神经节细胞的超微结构：给药组细胞变性程度明显轻于眼压降至正常的兔高眼压模型组和高压对照组，仅见部分细胞器轻度扩张，未见凋亡的典型改变。结论在眼压得到一定程度控制情况下当归补血汤对实验性高眼压所致的视网膜神经节细胞的凋亡具有抑制作用。

尹连荣等^[22]用补阳还五汤加减浓缩剂剂(1X10 g·L^-1 ) (黄芪180g、当归尾30g、赤芍30g、川芎18g、红花18g、菟丝子30g、枸杞子30g)给大鼠高眼压模型灌胃(10 g·kg^-1 )，结果显示，补阳还五汤能明显抑制高眼压大鼠视网膜神经节细胞的凋亡，进而抑制青光眼性视神经损害的进一步发展。

张宗端等^[23]利用优视胶囊（灯盏花素、总黄酮等）对急性高眼压兔眼闪光视网膜电图的影响，从实验结果显示，优视胶囊可能通过改善急性高眼压兔眼视网膜微循环与缺血、低氧状态，增强视网膜、视神经组织耐受缺血、低氧的能力，减轻视网膜、视神经组织的病理学损伤，从而起到保护视功能的作用。

高延娥等^[24]在益阴明目合剂（黄精、枸杞子、五味子、石菖蒲、党参、麦冬等组成）对急性高眼压大鼠实验研究中显示，益阴明目合剂能有效提高大鼠视网膜超氧化物歧化酶活力，降低丙二醛含量，降低血浆内皮素含量。说明该合剂通过清除自由基，改善微循环而起到视神经保护的作用。

东长霞等^[25]研究了青光安颗粒剂(主要由黄芪、生地、茯苓、地龙、红花等组成)对急性高眼压兔视网膜组织结构及细胞凋亡的影响，结果发现该颗粒剂具有加速急性高压眼状态后视网膜组织中NO及谷氨酸的清除，明显保护视网膜超微组织结构，减少神经节细胞凋亡的作用。

3传统中药对临床青光眼治疗干预的概况

张玲等^[26]对56例青光眼术后低眼压综合征运用中药汤剂，分气血瘀滞（柴胡10g，郁金

10g，夏枯草10g，白芍10g，栀子10g，木贼10g，菊花10g，生黄芪10g，升麻3g，当归lOg，红花10g）；气虚血瘀（生黄芪15g，党参10g，茯苓10g，升麻3g，赤白芍各10g，丹参10g，当归10g，炒丹皮10g，三七粉3g，茺蔚子10g，车前子15g）；脾肾虚损（生黄芪10g，党参10g，茯苓10g，杜仲10g，山药10g，枸杞子10g，桑寄生30g，升麻3 g，白芍10g，当归10g）三型辨证施治，患者眼压均不同程度上升到正常范围，视力、视野及眼底也有不同程度改善。

李廷超^[27]使用银杏叶对3例青光眼高眼压控制后的患者进行治疗，患者服药1-3周后停药，眼压控制在l7.30～20.55 mmHg之间，随访2年以上未发作。提出在控制眼压的基础上应用银杏叶，可能通过改善眼部微循环而达到保护视神经视网膜神经节细胞的目的，甚至可能挽救部分濒临死亡的神经细胞，改变硬化变性小梁组织的作用。

李蓓等^[28]用药物或手术控制眼压≤2.99kPa(21mmHg)的原发性开角型青光眼36例65眼随机分为复明片治疗组和甲钴胺片对照组。治疗3疗程后得出结论，复明片对开角型青光眼患者具有较好的疗效，可以明显改善患者mfERG（多焦视网膜电图）的振幅密度及改善患者视乳头部分结构参数，mfERG和HRT（海德堡视网膜断层扫描仪）可以做为评估其有效性的敏感方法。

李淑敏等^[29]利用益脉康片（成份为灯盏细辛，主要活性成份为总黄酮）治疗青光眼术后视野缺损的患者，将患者分为对照组和治疗组，对其疗效进行比较观察，结果显示，长期服用益脉康，具有扩大视野，提高视敏度，改善视功能的作用。

庞有慧等^[30] 葛根、三七、银杏叶三种中药制剂对60例110只眼青光眼视神经萎缩患者，单盲随机分为4组，4组分别给与葛根注射液、银杏叶注射液、三七注射液和脑组织蛋白水解物。在视力、视野、视觉诱发电位方面进行治疗前后的比较及各种药物的比较。治疗后，4组视力恢复有效率分别为64.00% ，55.56% ，65.52%，27.59%, 结论：葛根、三七、银杏叶三种中药注射制剂能改善视网膜微循环，减轻视网膜超微结构损伤，对青光眼视神经萎缩有较好的治疗作用。

李金山^[31]经手术或药物治疗眼压已控制的原发性闭角型青光眼患者56例(62眼)，随机分为2组，治疗组3O例(34眼)，口服刺五加片治疗5个疗程；对照组26例(28眼)，未用任何有助于恢复视功能的药。结果显示5个疗程后，治疗组平均视力为0.65±0.38，显著高于对照组(P< 0.01)，视野改善明显高于对照组(P<0.01)，治疗组F—ERG的b波振幅值、P—VEP的P10O波潜伏时及振幅值改善明显高于对照组(P＜0.05)，表明刺五加片口服可改善原发性闭角型青光眼。

4小结

青光眼是眼科的常见病、急重病，但由于其发病机制的复杂性，至今未找到一种有效的根治方法，对青光眼的研究任重而道远，构建较理想的青光眼动物模型并对其发病、治疗、预防等基础实验与研究具有重大的意义。传统中药在干预青光眼治疗中所起的作用是无法替代的；通过对高压眼动物模型中药干预的大量实验研究，中药具有扩张血管，增加血流量，改善视神经供血，增强视网膜血管和视神经的耐缺氧能力、降低血液粘稠度、改善轴浆运输、清除缺血后再灌注产生的氧自由基等作用。临床实践表明，中药除有降压作用外，还能保护视神经，甚至可能挽救部分濒临死亡的神经细胞，扩大视野，从而提高患者的视功能。虽然中药对青光眼视功能保护作用的研究已取得很大进展，但同时也存在着缺点与不足，例如：①中药对高眼压青光眼模型治疗干预的机制还不够明确，研究不够深入，有些结论只是推测，尤其是中药复方研究数据较少；②临床研究质量较低，研究样本量小，疗效评价标准缺乏统一性。总之，中药治疗青光眼是安全的^[32]，应充分利用现代科技手段，结合中医基本理论，进一步研究和开发传统中药，并且成立专门的研究机构，统一基础与临床研究的标准，疗效的评价体系，这会对青光眼治疗起重大的促进作用。

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