娄峻

【摘要】尿液红细胞检测是检测泌尿系统疾病，特别是肾脏疾病的重要实验指标之一，UF1000i利用流式细胞术，细胞染色和电阻抗技术，具备最适于尿中有形成分检查的性能和功能，能给尿沉渣有形成分进行定量分析，并给出红细胞散射光分布直方图，红细胞信息（RBC-Info），通过尿干化学仪潜血（ERY），尿沉渣仪分析与显微镜镜检，能更准确鉴别血尿来源，排除假阳性获得可靠依据。

【关键词】血尿，UF1000I, 显微镜镜检,  尿干化学仪潜血（ERY）

1 材料和方法

1.1材料

l 1.1.1仪器

UF1000I型全自动尿沉渣分析仪，配套试剂及质控物（日本sysmex公司），尿干化学分析仪迪瑞H-500及配套11项尿液干化学试纸条。OLYMPUSCH-K双目镜显微镜

1.1.2标本来源

随机收集本院门诊及住院尿液沉渣RBC异常标本800例。

1.2方法

所有885份结果的标本是用一次性塑料尿杯收集门诊及住院患者清洁中段尿，每份充分混匀后分成两管各10ml，一管用于尿干化学检测，一管严格按照UF1000I的操作方法进行尿沉渣及显微镜分析，

2 结果

对885份样本分别通过尿液干化学试带法与尿沉渣仪镜检（表1）；尿沉渣仪镜检与显微镜（表2）；尿液中各种沉渣所占的比例（表3）获取如下数据：

              表1  两种方法检测结果  （尿液干化学试带法与尿沉渣仪镜检）                                                     

 干化学法      例数                尿沉渣镜检                                 

                       RBC阴性    RBC阳性率（﹪）  RBC阳性    RBC阳性率（﹪）                              

阴性         48         46 95.8 2 4.2

微量         312        285 91.3 47 8.7

1+           209        143 68.4 66 31.6

2+           161        89 55.3 72 44.7

   3+           155        32           20.1             123          79.9              

              表2两种方法检测结果（尿沉渣仪镜检与显微镜）                         

血尿来源   病例数               UF1000I                     镜检                                   

                    多形  混合  均一  诊断符合率（﹪）  多形 混合  均一  诊断符合率（﹪）

肾性       126 118   6    2        93.6 108  10    9 85.7

非肾性 458   12    3    443      96.7 15   13    430    93.8

混合性     301    27   256   18       85.0        21   244   36     81.0                  

                    表3尿液中各种沉渣所占的比例                                  

   项目    真性RBC尿  草酸钙结晶   无定性结晶   酵母样菌   细菌   其它   合计

   例数      560 58 17 25 16 9    685

   百分比    63.2           6.5        1.9           2.8        1.8     1.0   77.4                    

3讨论

尿液有形成分分析对临床许多疾病的诊断和治疗提供重要依据，UF1000i利用流式细胞术，细胞染色和电阻抗技术来识别和计数尿中细胞，管型，结晶，细菌，精子及酵母样菌等各种有形成分，并对红细胞做形态分类和提供渗透压参数。本实验表明UF-1000I计数红细胞受到结晶，精子，细菌及酵母样菌等各种有形成分干扰。： 变形红血球；非均一性红细胞

1. 红细胞(RBC) 　　红细胞出现在散射图的左角。由于红细胞在尿液中直径大约是8.0um，没有细胞核和线粒体，所以荧光强度(Fl) 很弱，红细胞在尿液标本中大小不均，且部分溶解成小红细胞碎片，或者在肾脏疾患时排出的红细胞也大小不等，因此红细胞前向散射光 强度(Fsc)差异较大。一般来看，Fl几乎极低和Fsc大小不等都可为红细胞。

红细胞数量变化的临床意义：显微镜计数法，正常人尿中红细胞约为<100万/24h；UF-100仪器法参考值为男性0-12/ul，女性0-24/ul；离心后为0-偶见/HPF(高倍视野)，如每高视野均可见1-2个增多，≥3/HPF 为镜下血尿。通过观察尿红细胞数量可帮助血尿有关疾病（如肾炎、膀胱炎、肾结石、肾结核等）的诊断和鉴别诊断；通过动态观察这种 病人尿红细胞数量变化，可确定病人治疗的疗效观察和预后。

泌尿道出血的定位：1979年Birch和Fairley 首先用相差显微镜观察红细胞形态变化，把血尿分肾小球血尿（简称肾性）和非肾小球血尿（简称非肾性）两大类，这种分类方法以后得 到了许多学者赞同。这种分类方法主要是根据红细胞形态的变化，将均一性的红细胞（红细胞形态基本与正常红细胞相似）归为非肾性血 尿，非均一性的红细胞（红细胞形态大小不等）归为肾性血尿。但显微镜检查法是通过人眼观察单个红细胞的形态，需要熟练的技术并受 主观因素的影响。

    使用全自动尿沉渣分析仪鉴别血尿来源，简单快速，不受主观因素影响。UF-100在判别红细胞形态信息时有二个新的参数：RBC-P70Fsc和RBC-Fsc-DW。

    RBC-P70Fsc>100ch正常红细胞(红细胞形态较均一)，非肾性血尿

    RBC-P70Fsc<80ch小红细胞（红细胞形态大小不等），肾性血尿

RBC-Fsc-DW>50ch混合红细胞

尿液的酸碱度和尿液的渗量都直接影响尿红细胞的形态。1996年Georgopoulos研究证实，尿红细胞在渗透量<700mOsm/L或尿pH≥7时，红细胞的形态会发生变化，从均一性向非均一性改变。

2.细菌（BACT）   尿液中当细菌浓度超过一定时，仪器将把大的成双的细菌误认为尿红细胞。有实验结果显示在菌尿和非菌尿液中，尿红细胞UF-1000I测定≥15∕μl而镜检＜15∕μl分别占总检测数的21.5﹪和6.5﹪。两者Ρ＜0.01，说明差异有非常显著意义。  干化学法的红细胞检查采用潜血表达，其原理是利用红细胞中血红蛋白具有过氧化酶的活性，使色原氧化而产生颜色变化。由于其通过化学方法提供尿液检查的信息，存有不少干扰因素，特别是菌尿有不少文献已通过实验证明是干扰尿干化学仪潜血（ERY）的主要因素，因为微生物产生的过氧化物会使色原氧化而产生颜色变化，出现假阳性，以上结果说明细菌对UF-1000I测定红细胞有一定的影响作用。因此除肾病外，临床医生应根据患者的实际情况，分析尿干化学仪潜血。

3.结晶   出现在散射图红细胞区域，由于结晶的多样性，所以其散射光强度分布很宽，尿酸盐依靠自己的荧光，其分布区域和红细胞重叠在一起，因结晶的中心分布不稳定，所以它和红细胞能够被区分开。当尿酸盐浓度增多时，部分结晶会对红细胞计数产生影响。

4.酵母细胞和精子细胞     酵母细胞和精子细胞由于含有RNA和DNA，荧光强度很高，繁殖过程中的酵母细胞和精原细胞荧光强度更强，这些细胞散射光强度与红、白细胞差不多，所以酵母细胞散射图分布在红、白细胞之间的区域。由于酵母细胞的前向散射光脉冲宽度小于精子细胞的前向散射光脉冲宽度，根据前向散射光脉冲宽度，可将酵母细胞和精子细胞区别开来。但在低浓度时，精子细胞与酵母细胞区分有一定的难度。在高浓度时，部分酵母细胞对红细胞计数有交叉作用。

　　因此，当仪器对酵母细胞、精子细胞和结晶有标记时，都应离心镜检，才能真正区分。我们确认尿常规RBC结果时，既要考虑ERY阳性，又要重视尿沉渣仪红细胞信息（RBC-INF）的显示状态，同时通过红细胞信息（RBC-INF）准确地对血尿来源的鉴别诊断。通过显微镜镜检，结合临床综合分析进一步排除干扰因素减少UF-1000I对RBC检测的假阳性。对某疾病或某些因素使红细胞破坏的尿液标本，在显微镜下无法观察到的情况下，尿液干化学分析可提供一定的参考价值，因此必须结合临床综合分析，动态观察，合理解析实验结果，决不能只看尿沉渣分析仪的检测结果，而忽视显微镜检测，绝不能以干化学法代替镜检法，才能为临床诊断，治疗及预后监测提供有力的依据。

参考文献：

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[2] 熊立凡。临床检查基础[M]。第3版。北京：人民卫生出版社，2003:196

[3] 丛玉隆，王淑娟。今日临床检验学[M]。北京：中国科学技术出版社，1997:275

[4] 郑军。菌尿对UF-100检测尿液红细胞的影响[J]。上海医学检验杂志，2002,17（5）：348-350

[5] Heang ML.hematuria’due to bacteriuria [J].Arch Pathol Lab Med。1995,119:717-776

河南省驻马店市中心医院检验科

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娄 峻 （主管检验技师）