郭占景¹ 王生平¹  狄振宇 ² 徐保红¹  宋胜军² 高伟利 ¹ 董永辉²  白萍¹

（1、石家市庄疾病预防控制中心，河北 ，石家庄，050011；2、石家庄市卫生监督局，河北 ，石家庄，050000）

摘要：目的  了解石家庄市肉毒梭菌在环境中的分布情况，为预防、诊断、治疗肉毒梭菌食物中毒提供科学依据。方法  按照地貌，均匀抽取8个县(市、区)，采集土壤、食品和水三类样品，检测肉毒梭菌污染情况。结果  采集土壤、水、食品三类样品350份，肉毒梭菌检出15份，检出率为4.3%，其中，12份为B型肉毒毒素，3份为A型肉毒毒素。发生过肉毒中毒县（市、区）肉毒梭菌检出率高于未发生过县（市、区）(P<0.05)。山区与平原肉毒梭菌检出率没有显著性差异(P>0.05)。结论 石家庄市外环境中肉毒梭菌污染较以前严重，并且存在A型肉毒毒素。

关键词：肉毒梭菌；环境 ；分布

Distribution of clostridium botulinum in environment of

shijia zhuang city   GUO Zhan-jing, WANG Sheng-ping, DI Zhen-yu, et al.( The Shijiazhuang City Center for Disease Control and Prevention，Shijiazhuang，050011，Hebei，China)

Abstract：Objective  To explore distribution of Clostridium botulinum in environment so as to provide scientific basis for preventing, diagnosing ,and treating  food-borne botulism. Methods According to landform,the 8 areas were chose evenly to collect soil ,water and food for testing Clostridium botulinum. Results  A  total of 350 samples were tested.  Clostridium botulinum was found in 15 samples（4.3%）. Clostridium botulinum typeB was found in 12 samples, and  Clostridium  botulinum  type A  was found in 3 samples . The contamination rates in  the areas having happened to food-borne botulism were higher than in areas no having happened to food-borne botulism(P<0.05). In regard to the contamination rates ,significant differences were no found between the mountain areas  and the plain areas(P>0.05).Conclusion Prevalence of Clostridium botulinum in Shijiazhuang city was higher than before,and Clostridium  botulinum  type A exists.

   Key words: Clostridium botulinum; Environment; Distribution

肉毒梭菌为革兰氏阳性、厌氧、产孢子的杆菌，广泛分于土壤、粪便、江河湖海等自然环境中，易于污染食品而引起食物中毒。30年前候正宗报道了河北省外环境中存在的肉毒毒素主要是B型^[1]，随着自然环境变化以及工业化进程加快，环境中肉毒梭菌分布及其毒素类型是否发生变化呢？尤其是近年来市场不断开放，各种食品贸易往来频繁，各地肉毒梭菌分布和毒素类型差异会越来越小^[2]。近年来，石家庄发生了数起肉毒梭菌食物中毒，为了解石家庄市肉毒梭菌在环境中的分布情况，抽取了8个县（市、区），采集土壤、水、粮食及发酵食品等进行了肉毒梭菌污染情况调查，现将结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 样品种类和数量

采集庭院土88份，田地土60份，未开垦荒地64份，河滩土和河底淤泥32份，污染水20份，生活饮用水30份，黄豆14份，低温灌肠类食品10份，家庭自制发酵食品22份，市售发酵食品10份，共350份。

1.2 样品采集

按照方位从西北到东南选择采样点，对曾经发生过肉毒梭菌中毒的县（市）、区，山区选择平山县、灵寿县，平原选择正定县和晋州市；对未发生过肉毒梭菌中毒的县（市）、区，山区选择井陉县和赞皇县，平原选择新集市和赵县。无菌操作采集样品250—300克置于无菌塑料口袋内。土壤在地表下10—20厘米处取，按照不同位置，采集5个点，点与点间相距10—50米，混匀后放入无菌塑料袋内；污染水用无菌玻璃瓶在水面下30厘米处取450ml；低温灌肠和市售发酵类食品从市场购买；其它样品从农户家采取。

1.3 样品处理

   各类样品均按照GB4789.12-94规定进行处理。

1.4 肉毒毒素的检测与型别判定

按照GB4789.12-94进行肉毒梭菌的检测与判定。

肉毒诊断血清应用兰州生物制品研究所生产冻干的肉毒诊断血清。

1.5 统计方法

所有数据输入Excel表中，应用SPSS10.0统计软件进行统计分析。

2 结果

2.1 各类样品肉毒梭菌检出情况

本次调查共采集土壤、水、食品三类样品350份，检出肉毒梭菌15份，检出率为4.3%，其中，12份为B型肉毒毒素，3份为A型肉毒毒素。三类样品中土壤中肉毒梭菌检出率最高，为5.3%；水中肉毒梭菌检出率次之，为2.0%；食品最低，为1.8%。各类样品肉毒梭菌具体检出情况见表1。

2.2 发生过与未发生过肉毒中毒的县（市、区）肉毒梭菌检出情况

发生过肉毒中毒的县（市、区）采集样品182份，检出肉毒梭菌14份，检出率7.7%，其中，B型10份，A型2份；未发生过肉毒中毒的县（市、区）采集样品168份，检出肉毒梭菌3份，检出率1.8%，其中，B型2份，A型1份。经Fisher’s确切概率法检验，发生过肉毒中毒县（市、区）肉毒梭菌检出率高于未发生过县（市、区）（P﹤0.05）。

2.3 山区与平原肉毒梭菌检出情况

山区采集样品173份，检出7份，检出率4.0%，其中，B型5份，A型2份；平原采集样品177份，检出8份，检出率4.5%，其中，B型7份，A型1份。 经Fisher’s确切概率法检验，山区与平原肉毒梭菌检出率没有显著性差异（P>0.05）。

3 讨论

3.1 自然界中肉毒梭菌的分布情况

  自从1895年Van Ermengem首次报道比利时因食用火腿引起肉毒中毒爆发并分离出肉毒梭菌以来^[3]，世界各地均有本病的发生，并且各洲均检出了肉毒梭菌，至今共分离出七个型别的肉毒毒素，分别是A、B、C、D、E、F、G型，其芽孢多分布在土壤、尘埃、水、粪便、海泥等环境中。就国内肉毒梭菌的分布状况，最早见于1922年Shoenhol和Meyer二氏在河北、山西等地的泥土中分离出B型肉毒梭菌的报告^[4]。过去几十年国内对肉毒梭菌的分布进行了一些调查研究，共检出了A、B、C、D、E、F六个型别的肉毒梭菌，此外还检出了A+B、E+B、E+A、C+D4种混合毒素。1974年在我国西北地区不同环境中进行了广泛的肉毒梭菌分布调查，其型别主要以A、B型为主，部分地区检出了E型。高庆仪等人分别于1977年和1981年对沿海地区土壤及各类海鱼中肉毒梭菌的污染情况进行了调查，除B型未检出外，其它A、C、D、E、F型均检出，首次证实了我国存在D、F型^[5、6]。1981—1982年侯正宗对河北省部分地区的土壤、海产品、粮食等进行了肉毒梭菌污染情况调查，毒素型以B型为主，并且首次在我省检出了E型^[1]。而本次在石家庄地区外环境中检出了A、B型肉毒毒素，以B型为主，但A型在石家庄土壤中首次检出，为今后预防、诊断和治疗肉毒梭菌中毒提供了新的科学依据。

3.2 石家庄地区肉毒梭菌检出情况

本次调查土壤、水、食品环境中肉毒梭菌检出率为4.3%，纵向来看，此结果较30年前侯正宗对河北省自然环境中肉毒梭菌检出结果要高些（3.1%）^[1]，基本与王想霞对濮阳市肉毒梭菌生态分布研究结果一致（5.0%）^[7]，显著低于宁夏（34.4%）、新疆（17.3%）、西藏（15.8%）、青海（8.4%）以及山东（10.0%）^[2]。本次调查结果显示，肉毒梭菌检出率较高的是庭院土（6.8%）和未开垦荒地（6.3%），其次是污水（5%）和家庭自制发酵食品（4.5%），生活饮用水、黄豆、低温灌肠和市售发酵类食品未检出。表明肉毒梭菌主要存在于土壤、污水和家庭自制发酵食品中，生活饮用水、黄豆、低温灌肠和市售发酵类食品未被污染。

本次调查结果显示，发生过肉毒梭菌中毒的地区肉毒梭菌检出率高于未发生过地区，具体原因有待于进一步研究，但未发生过肉毒中毒的地区并不是没有受到肉毒梭菌污染，并且还检测出了1份A型肉毒梭菌。所以，对于未发生过肉毒中毒的地区也要引起高度重视，在制作食品时，尤其是发酵类食品时，应严格注意卫生操作，食用时应高温加热。对于肉毒梭菌污染严重的地区，除了做好相关知识宣传外，还应加强食品肉毒梭菌监测，以预防肉毒梭菌食物中毒的发生。

参考文献

1、侯正宗.河北省产毒肉毒梭菌在自然环境中污染情况初步报告.中国公共卫生，1985,4（4）：10—11.

2、王振宇，郑翎.我国肉毒梭菌地理分布特征的分析. 中国公共卫生，1992,8（10）：460—463.

3、吴光先.肉毒梭菌食物中毒的研究进展.肉品卫生，1987，（10）：15—17.

4、Louis D,S.Smith.致病性厌气菌.第1版，北京：人民卫生出版社，1960:93.

5、高庆仪.沿海地区土壤及海产品肉毒梭菌污染情况的调查.中华预防医学杂志.1980，14（4）：214.

6、高庆仪, 刘宏道，姚景惠等.我国沿海地区土壤及海产品中产毒肉毒梭菌污染情况的调查. 中华预防医学杂志.1984,18(3):129.

7、王想霞，杜俊甫，麻顺广等. 濮阳市肉毒梭菌生态分布的研究. 中国公共卫生，2000,16(3)：282.

作者简介：郭占景（1975-），男，河北魏县人，硕士，主管医师，研究方向：食物中毒