朱晓松 潘佩蕾 周芳美 陈宜涛 程东庆*
(浙江中医药大学生命科学学院微生物与免疫学教研室,杭州,浙江310053)
【摘要】目的:探讨商陆抑菌活性的有效成分。方法:采用琼脂扩散法测定不同商陆提取物对临床常见的15株病原菌的抑菌圈;采用液体稀释法测定最小抑菌浓度。结果:商陆不同粗提物对病原菌有不同程度的抑制作用,商陆水煎液对细菌抑菌作用不明显,仅对不动杆菌、白假丝酵母、新生隐球菌有一定抑制作用,最小抑菌浓度分别为500、500、62.5 mg/ml。多糖提取物仅对产气荚膜梭菌、痢疾志贺菌有一定抑制作用,最小抑菌浓度为60.0、7.5mg/ml。皂苷提取物抑菌效果较明显,30%乙醇提取的商陆皂苷抗菌谱较广,对产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌、甲型副伤寒菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、白假丝酵母共11株病原菌都有抑菌作用,最小抑菌浓度范围为17.6~70.0mg/ml;60%和90%乙醇提取的商陆皂苷无抑菌活性。结论:商陆抑菌活性主要有效部位为极性较大的皂苷类提取物。
【关键词】商陆;抑菌活性
抗生素的应用使人类许多严重的细菌和真菌感染性疾病得到了有效控制。但是由于不合理使用抗生素导致了大量病菌耐药,随着病原菌耐药性的不断传播,耐药菌肆虐人类健康已成为21世纪的全球性话题。挖掘民族医药宝库,寻找新的中药有效抗菌药物,具有重大的现实意义。
中药商陆系商陆属植物商陆(Phytolacca acinosa Roxb.)和垂序商陆(Phytolacca americana L.)的干燥根,始载于《神农本草经》,性寒味苦,归肺、脾、肾、大肠经,有毒,列为下品,具有逐水消肿、通利二便、解毒散结等多种功效,主治水肿胀满、二便不利、臃肿、疮毒等[1]。文献报道商陆具有一定的抗炎抗菌抗病毒活性[2],但对其抗菌有效部位的研究还不够深入。我们不同方法提取商陆,研究各提取物体外抑菌活性,为进一步开发商陆奠定基础。
1 材 料
1.1 商陆饮片:购于浙江中医药大学饮片厂。
1.2 供试的病原菌:
标准菌株:金黄色葡萄球菌(25923)、大肠埃希菌(25922)、铜绿假单胞菌(27853)为本室保存菌。
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基金项目: 浙江省大学生科技创新活动计划资助(编号:1160100655 )
*通讯作者:程东庆(1971-),女,博士,副教授,硕士生导师,药学、微生物与免疫学研究。电子邮箱:b2006069@163.com
临床分离株:产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌、肠球菌、甲型副伤寒菌、乙型副伤寒菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、白假丝酵母、新生隐球菌,由浙江中医药大学附属第一医院检验科细菌室提供。
1.3 试剂和仪器:
D101大孔树脂(上海摩速科学器材有限公司,20091010);正丁醇(浙江杭州双林化工试剂厂,20090212,分析纯);香草醛(上海双香助剂厂,20090718,分析纯);浓硫酸(中国杭州化学试剂有限公司,20081109,分析纯);薄层硅胶G(青岛海洋化工有限公司,20090103,分析纯)。旋转蒸发仪(上海申顺生物科技有限公司,R-201);精密电子天平(奥豪斯国际贸易上海有限公司,AR520);4℃冰箱 (海尔集团,BCD-205E/Y);手提式压力蒸汽灭菌器(上海医用核子仪器厂,YXQ.SG4.280型);电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司,DHG-9070A型),等。
1.4 培养基:
MH培养基:蛋白胨1%,牛肉膏0.3%,氯化钠0.5%,琼脂2%。沙氏培养基:葡萄糖4%,蛋白胨1%,琼脂2%。
2 方 法
2.1 供试样品的制备:
商陆水煎液的制备:称取商陆饮片100g,加蒸馏水煮沸提取3次,每次1h, 液料比为10∶1。合并提取液,干净纱布过滤,滤液浓缩至100ml,即每1ml含生药1g,4℃冰箱保存备用。