曾家耀¹陈明科³江现强¹王清坚 ¹ 李秋红³ 谢威²

1广西中医学院第一附属医院胃肠腺体外科 南宁 530023

2 广西中医学院2007级研究生

3广西中医学院2009级研究生 

【摘要】 目的 探讨消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对术后胃癌血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法 60例行手术治疗的进展期胃癌患者，按随机数字表分为治疗组和对照组，治疗组32例，采用腹腔热灌注化疗同时口服消瘤汤，对照组28例，单用腹腔热灌注化疗方案进行治疗，观察两组生存质量、血清血管内皮生长因子水平(VEGF)变化及VEGF蛋白表达情况。结果 治疗组生存质量的改善明显优于对照组（P< 0.05）；治疗前两组VEGF水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后两组VEGF水平均下降(p<0.05)，且治疗组下降更为显著(P<0.05)；治疗组治疗前后血清VEGF蛋白表达明显下降，两组比较差异差异有统计学意义（（P<0.05）。结论 瘤汤消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对胃癌术后患者有一定的防治作用，能改善病人生存质量，其作用机制之一可能是通过抑制血清中VEGF蛋白表达进而抑制肿瘤血管生成发挥作用。

基金项目：广西科技厅自然基金项目（桂科自0728178）

广西中医药管理局中医药科技专项课题（GZKZ09-25）

【关键词】 腹腔热灌注化疗；消瘤汤；血管内皮生长因子；胃癌

Effects of xiaoliu decoction combined  with  hyperthemic peritoneal perfusion chemotherapy on the protein expression of serum vascular endothelial growth factor in gastric cancer after surgery treated

1 Zeng Jiayao ¹ Chenmingke³ Jiangxianqiang¹   Wangqingjian¹   liqiuhong³  Xie Wei²  

Department of glands Gastrointestinal Surgery, The First Affiliated Hospital to Guangxi Traditional Chinese Medicine University , Nanning  530023, China

2 2007 postgraduate of the Guangxi Traditional Chinese Medicine University

3 2009 postgraduate of the Guangxi Traditional Chinese Medicine University

【Abstract】 Objective  To evaluate the Effects of xiaoliu decoction combined  with  hyperthemic peritoneal perfusion chemotherapy on the protein expression of serum vascular endothelial growth factor in gastric cancer after surgery treated . Methods  60 cases with surgical treatment of patients with advanced gastric cancer were randomly divided into two groups,Treatment Group of  32 patients used to intraperitoneal hyperthermic perfusion chemotherapy, oral Xiaoliu decoction; the control group of 28 patients intraperitoneal hyperthermic perfusion chemotherapy alone treatment program; Observed two groups of Quality of Life and serum levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF protein expression. 

Results  The treatment group after treatment to improve the quality of life much better than the control group (P <0.05); VEGF levels were no significant difference before treatment (P> 0.05),Two groups of VEGF level declined after treatment，compared with before treatment were statistically significant difference (P < 0.05),And the treatment group fell more significantly (P < 0.05); VEGF levels were no statistically significant difference before treatment (P> 0.05), VEGF levels were statistically significant difference after treatment (P> 0.05),Two groups of VEGF level declined after treatment，compared with before treatment were statistically significant difference (P < 0.05).Conclusion Xiaoliu soup combined  with  hyperthemic peritoneal perfusion chemotherapy

on patients with advanced gastric cancer prevention and treatment of postoperative recurrence have some preventive effect, can improve the quality of patient survival, its function mechanism possibly is through suppresses the VEGF of the blood serum protein expression to suppress  the tumor blood vessel production to realize.

【Key words】Hyperthemic peritoneal perfusion chemotherapy 

;Xiao liu decoction；VEGF； Gastric cancer

腹腔内局部和区域复发以及肝转移是胃癌术后最主要的致死原因,但其复发及转移的机制尚未明了，而血管内皮生长因(vascular endothelial growth factor，VEGF)在胃癌术后复发作用机制的研究中的作用日益得到重视，VEGF是具有促进内皮细胞增殖和迁徙，增加血管通透性的细胞因子。本研究主要观察消瘤汤联合腹腔热灌注化疗对进展期胃癌术后患者生存质量的影响及研究消瘤汤对VEGF蛋白表达的影响，探索消瘤汤联合腹腔热灌注化疗防治胃癌术后复发的作用机制。

1材料与方法

1.1一般资料 我院自2007~2009年1月间住院的进展期Ⅱ期、Ⅲ期胃癌患者60例。按随机数字表分为治疗组和对照组，治疗组（消瘤汤联合腹腔内热灌注化疗）32例，其中男23例，女9例，年龄34～75岁，中位年龄55岁。其中腺癌21例,未分化癌6例,鳞状细胞癌3例,其他2例。按TNM分期：Ⅱ期25例，Ⅲ期7例；对照组（单纯腹腔内热灌注化疗）28例，其中男21例，女7例，年龄28～74岁，中位年龄53岁。其中腺癌20例,未分化癌5例,鳞状细胞癌2例,其他1例。按TNM分期：Ⅱ期22例，Ⅲ期6例。两组在性别、年龄、分期具有可比性（P>0.05）。

1.2主要仪器设备 HGGZ-102型体腔热灌注机（由珠海市和佳医疗设备有限公司生产）,液体流量/min:20~600mL之间，可调控温度精度:±1.5℃。该仪器解决了人工腹水、温度不均匀、维持有效治疗温度时间短等腔内灌注设备上的最大困难,并对工作环境无特殊要求。HGGZ-102型一次性医疗专用循环管路。

1.3治疗方法

1.3.1术中腹腔热灌注 术中根治或姑息性切除癌灶后,于盆腔和上腹壁各置一硅胶管,与热灌注化疗仪的导管系统相连接,缝合切口;由热灌注化疗仪以150mL/min的速度循环灌注化疗液;持续30min,腹腔内温度为（43.0±0.5）℃。

1.3.2术后早期腹腔热灌注 术后第1天开始行腹腔热灌注，灌注前用已消毒过的特制引流管清除装置清除引流管内的纤维组织、凝血块及坏死脱落组织。将体外循环管路装于灌注机由热灌注化疗仪以150mL/min的速度循环灌注化疗液;持续30min,腹腔内温度为（43.0±0.5）℃。每周一次，术后连用3周。

1.3.3化疗液的配制 5-氟尿嘧啶（5-Fu）1000mg，顺铂80mg加入1500mL生理盐水中完全溶解。

1.3.4 治疗组在上述基础上于术后患者排气排便后加口服中药消瘤汤煎剂（党参15g、黄芪15g、薏苡仁20g、田七6g、扶芳藤12g、山慈菇15g、紫河车6g、半枝莲15g等），每日一剂，水煎分三次服用，每二周一疗程，共用4个疗程。 

1.4观察指标

1.4.1 生存质量评定 依据一般状况评分标准Karnofsky（KPS），在治疗开始前和治疗结束时对患者生存质量进行评价，分为提高、稳定、降低三级，即疗程结束后，较治疗前评分增加10分者为提高，减少10分者为降低，增加或降低小于10分者为稳定。

1.5.2 血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的测定 比较两组治疗前和治疗后组间及组内患者血清血管内皮生长因子(VEGF)指标的变化。所有病例均空腹采集外周静脉血，用ELISA方法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)的水平。

1.4.3血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达检测 比较两组治疗前和治疗后组间和组内患者血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况。所有病例均空腹采集外周静脉血，用western blot法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况。

1.5统计学处理  应用SPSS13.0统计软件进行统计数据处理，以 P<0. 05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1治疗前后生活质量的比较（KPS评分） 经秩和检验，治疗组生存质量的改善明显优于对照组（P< 0.05）见表1。

表1  治疗后卡氏评分比较

   组别      n        升高       稳定       下降      总有效率（%）

治疗组       32        23         6          3         29（90.26）

对照组       28        6          12         10        18（64.29）

2.2两组血管内皮生长因子(VEGF)的测定  治疗前两组VEGF水平比较差异无统计学意义(t=0.100,P=0.920>0.05)，治疗后两组VEGF水平均下降(治疗组t=12.908,P=0.000<0.05；对照组t=5.876,p=0.000<0.05)，且治疗组下降更为显著(t=19.807,P=0.000<0.05)见表2。

表2  两组血管内皮生长因子(VEGF)的比较 (pg/mL ,x(—)±s)

 组别      n        治疗前           治疗后          治疗前治疗后差值

治疗组    32     192.58±40.25     92.75±17.15         99.83±10.76

对照组    28     193.63±40.57    137.86±29.60         55.77±5.08

2.3两组血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的测定  治疗前两组VEGF蛋白表达比较差异无统计学意义(t=0.757,P=0.452>0.05)，治疗后两组VEGF蛋白表达比较差异有统计学意义(t=5.236,P=0.000<0.05)；治疗后两组VEGF水平均下降(治疗组t=144.008,P=0.000<0.05；对照组t=152.954,p=0.000<0.05)见表3。

     表3 消瘤汤对血清血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响 ( x(—)±s)

 组别                 n          治疗前               治疗后

治疗组                32      18.56±0.70            0.48±0.12

对照组                28      18.69±0.62            0.62±0.08        

2.4 随访结果   对术前癌组织已浸透浆膜或已有局部转移者术后1年、3年各进行1次随访见表4。

表4两组术前癌组织已浸透浆膜或已有转移者1年、3年生存率比较

  组别       例数          1年生存                         3年生存                   

                  例数    生存率（%）          例数     生存率（%）                                                                   

治疗组       19        16       84.21                 12        63.16

对照组       17         6       35.29                  3        17.65

注：经四格表确切概率法检验，两组患者1年、3年生存率比较， P<0.05。

3讨论

VEGF为目前发现的最强的内皮细胞有丝分裂原^［1］，是刺激肿瘤血管发生、血管重塑、血管芽生的关键调节因子^［2］，亦是目前了解最为深入的血管生成家族。许多体液因子及肿瘤基因都是通过调节VEGF而促进或抑制肿瘤血管生成。VEGF在胃癌的浸润和转移中起重要作用，血清VEGF表达水平可作为了解胃癌生物学行为和判断预后的指标^［3］。葛荣峰等^［4］报道VEGF的表达水平是影响胃癌患者预后的重要因素，肿瘤血管形成促进了肿瘤的侵袭和转移，这为胃癌抗血管形成的靶向治疗提供了分子生物学依据。

随着肿瘤新生血管形成机制的深入研究，传统中医药在预防肿瘤复发领域显示出重要的作用，相继发现一些中药的有效成分及复方制剂能抑制肿瘤新生血管的生成，从而发挥其抗肿瘤作用。柏长青等^[5]采用b-FGF诱导小鼠腹壁Matrigel种植体方法，测量Matrigel种植体中血红蛋白含量和微血管面积，结果低剂量黄芪、党参提取物，能促进Matrigel种植体内的血管生成，而高剂量则表现出抑制现象，表现出中医药特有的双向调节作用。同时有些中药复方制剂也显示出较强的抗肿瘤血管生成作用，陈达理等^[6]的研究表明具有破血化瘀，软坚散结之功效的鳖甲煎丸能显著抑制肿瘤的生长。姜晓玲等 ^[7]的研究表明薏苡仁，半枝莲，山慈菇等均具有调高机体免疫力，抑制肿瘤细胞生长的作用。张妮娜^[8]采用Matrigel栓、原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)建立体内外血管生成模型，以研究半枝莲的抗肿瘤作用，发现半枝莲能有效抑制肿瘤血管生成，其机制可能与阻断内皮细胞迁移、下调VEGF蛋白表达有关。霍伟等^[9]用参芪扶正注射液联合化疗治疗晚期结直肠癌临床疗效观察研究中证实参芪扶正注射液对晚期结直肠癌化疗有减毒增效作用，可以提高化疗的抑瘤率，改善患者的生存质量。奚胜艳等^[10]报道烃基红花黄色素A能明显抑制裸鼠BGC-823移植瘤生长及血管生成，是一较强的血管生成抑制剂，其抑制肿瘤血管生成的作用机制之一可能是通过抑制VEGF的mRNA表达来实现的。

     消瘤汤以党参，黄芪，紫河车为君药，有益气血，鼓舞正气，扶正驱邪的作用，以半枝莲，山慈菇，扶芳藤，田七为臣药，活血化瘀、解毒散结，驱除余邪，佐以薏苡仁健脾利湿，全方攻补兼施，气血并重，共奏扶正驱邪之功效。诸药合用共奏扶正驱邪之功。热化疗可以使肿瘤血管内皮细胞间紧密连接增多，间隙减小，血管壁变厚；甚至可以导致新生血管只有完整的基膜而缺乏内皮细胞，通过抑制肿瘤细胞合成与分泌VEGF，从而减少VEGF对血管内皮细胞刺激所引起的血管过度增生。笔者通过初步研究认为消瘤汤联合热灌注化疗对胃癌术后患者有一定的防治作用，能改善病人生存期质量，其作用机制之一可能是通过抑制血清中VEGF蛋白表达进而抑制肿瘤血管生成发挥作用 ，至于消瘤汤抑制VEGF的蛋白表达的具体作用机制、通过什么信号转导通路，以及它作用的靶细胞都需要我们今后做进一步的探讨。

参考文献

 [1] FerraN.Vascular endothelial growth factor as a target for antrcancer therapy.Oncologist,2004,1:2.

[2]  Jain R K. Molecular regulation of vessel maturation.Nat Med,2003,9(6):685.

[3] 任 伟，禹立霞，钱晓萍等.胃癌患者血清VEGF、MMP一2的表达及其与浸润和转移的关系. 肿瘤学杂志，2008，14（10）:824-826.

[4] 葛荣峰，华 东，吴玉玉等. 胃癌组织中VEGF、CD105表达与预后的关系. 现代肿瘤医学，2009，17（10）：1917-1919.

[5] 柏长青，宋颖芳，简文. 黄芪、党参提取物对小鼠Matrigel种植体血管生成的影响.细胞与分子免疫学杂志.2008 ，24(5): 498.

[6]陈达理，张绪慧.鳖甲煎丸抗肿瘤血管生成的实验研究.浙江中医杂志，2004,12（5）：537-539.

[7]姜晓玲，张良，徐卓玉,等.薏苡仁注射液对血管生成的影响.肿瘤，2000,20（4）：313-314.

[8] 张妮娜.半枝莲抑制肿瘤血管生成的作用及其机制研究.癌症，2005， 24( 12): 1459.

[9] 杨生平, 杜斌. 参芪扶正注射液治疗老年中晚期胃癌疗效观察. 中国社区医师．医学专业, 2010,12（229）:87.

 [10] 奚胜艳，张前，解华，等. 羟基红花黄色素A对裸鼠人胃腺癌BGC -823移植瘤血管及VEGF, bFGF mRNA表达的影响.中国中药杂志，2009，34（5）：605-609.